IGEM競賽團隊采訪水生動物病害防控技術專家

2022年8月25日，為(wei) 了更深入了解課題中對對蝦急性肝胰腺壞死綜合症(AHPND)的病原菌檢測、治療與(yu) 預防方案在實際應用中的可行性，我們(men) 聯係了福建省漁業(ye) 局水產(chan) 技術推廣總站，對實驗室副主任L老師進行了線上采訪。

L老師是福建省水產(chan) 技術推廣總站實驗室副主任、全國技術能手、福建省五一勞動獎章獲得者，任中國水產(chan) 學會(hui) 青年工作委員會(hui) 、福建水產(chan) 學會(hui) 病害專(zhuan) 業(ye) 委員會(hui) 、海水養(yang) 殖專(zhuan) 業(ye) 委員會(hui) 委員，主要從(cong) 事水生動物病害防控工作，在核心期刊發表論文十餘(yu) 篇。

本次采訪中，我們(men) 首先向L老師簡要介紹了課題的設計方案，L老師表示，如何有效防治由副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)引起的AHPND仍是一個(ge) 急需解決(jue) 的問題，有很多科研工作者也正投身於(yu) 此。但是，相關(guan) 研究多集中於(yu) 預防和檢測方麵，且實際生產(chan) 實踐中還是“防大於(yu) 治”。

我們(men) 了解到，目前針對AHPND的預防主要分為(wei) 以下幾個(ge) 方麵。首先是對早期蝦苗的檢測，確保蝦苗在投放時未攜帶病原；其次是“養(yang) 蝦先養(yang) 水”，主要通過向蝦塘投放益生菌來結合病原菌，減少對蝦病害的發生；同時也應注重池塘結構和水流控製的優(you) 化，實現集汙排放，並定期對蝦塘進行有效的清淤、消毒和翻曬工作。

其中，投放益生菌這一方法引起了我們(men) 的關(guan) 注。在我們(men) 的設計中，涉及到向蝦塘中投放攜帶有工程質粒或效應物質的細菌外膜囊泡(OMVs)，因此，我們(men) 向L老師請教了有關(guan) 該設計的可行性問題。他表示，益生菌的投放幾乎覆蓋了對蝦養(yang) 殖的全過程，甚至在投放蝦苗前，養(yang) 殖戶就會(hui) 在開始向蝦塘中投放益生菌。又因為(wei) 對蝦養(yang) 殖中排水量很大，到養(yang) 殖後期，一天內(nei) 蝦塘中更新水量甚至會(hui) 達到70%，所以在實際應用中，就需要確保投放物質的量始終保持有效水平，而這對我們(men) 課題來說，也是一個(ge) 值得考慮的關(guan) 鍵點。

病原菌檢測方麵，L老師談到，近年來水產(chan) 養(yang) 殖業(ye) 中水質檢測方法發展迅速，大多數對蝦養(yang) 殖場都能自行檢測養(yang) 殖水水質，有些甚至擁有小型實驗室可以做到微生物檢測；而那些規模較小的私人養(yang) 殖場，則可以聯係專(zhuan) 業(ye) 機構進行檢測。

同時我們(men) 也了解到，對蝦肝胰腺的顏色可作為(wei) 初步判斷對蝦是否具有患病風險的標準，而實驗室常用TCBS(Thiosesulfate-citrate-bile salt-sucrose agar，硫檸膽蔗瓊脂培養(yang) 基)平板培養(yang) 觀察綠色菌落的方法來粗略衡量不能利用蔗糖的弧菌數量，一定程度上能夠反映對蝦患有AHPND的風險。

然而，TCBS法的檢測準確性較低，不攜帶毒力質粒pVA1的副溶血性弧菌或不能利用蔗糖的非副溶血性弧菌雖不會(hui) 導致AHPND，但卻能在培養(yang) 基上形成綠色菌落；而攜帶pVA1且能利用蔗糖的弧菌，例如歐文斯氏弧菌(Vibrio owensii)，能夠引起AHPND卻在TCBS上表現為(wei) 黃色菌落。

副溶血性弧菌能夠導致對蝦患上AHPND的關(guan) 鍵在於(yu) 其毒力質粒上攜帶的毒素基因pirA和pirB，因此，要實現對該疾病快速準確的診斷，應利用核酸擴增、核酸雜交等分子生物學方法，精確靶向毒素基因，或利用免疫學方法對毒力蛋白PirAB進行檢測。

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